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抗体应用大全

生物耗材网:bioconsumable.com | 更新时间:2016-6-6

在生物医学研究领域,抗体是一类使用极其频繁的试剂。因其具有针对某种(些)特定表位的高敏感性和高特异性而成为研究应用中的理想试剂选择。此外,随着生物技术的不断发展进步,更加促进了抗体的大规模的生产和应用。在19世纪90年代,von Behring和Kitasato首先发现并描述了抗体。当时发现,非活性毒素能够在动物体内诱导出保护性免疫反应,从而对抗活性毒素,而且把这些产生了免疫保护的动物血清转移注射给其他动物,接受转移的动物也能获得同样的免疫保护。因此,抗体最初被称为抗毒素。但是,抗体后来才被发现其可以识别非常多种类的抗原。

根据最简单的定义,抗体即是B淋巴细胞抗原受体的可溶性形式,专门由成熟的B淋巴细胞产生。抗体免疫球蛋白分子由2条重链和2条轻链构成,根据其结构不同,可以把小鼠和人体内的抗体分为五类亚型。抗体分子的各个链之间以二硫键相连,从而使整个分子具有一定的灵活性。分子中没有轻链的部分称为可变区或Fc段(可结晶部分);此区域是由一组固定的基因所决定,同一个种属中的所有同亚型抗体此区域是一致的。分子中既有重链又有轻链的部分称为恒定区或Fab段(抗原结合区); 此区域的极端包含识别并结合靶抗原表位的高可变位点。Fab段也是由一组固定的基因决定,但需要进一步的体细胞突变产生独特的和高特异的可变位点(图1)。

1. 抗体的分子结构。红色线表示二硫键在重链之间的彼此连接及重链与轻链之间的连接。

目前是在动物体内或动物细胞内生产抗体。可从生产厂商购买或通过实验自行制备获得单克隆抗体(同种类亚型和抗原特异性)和多克隆(不同种类亚型和抗原特异性)抗体。多克隆抗体从被免疫靶抗原的动物体内的血清分离获得。而多克隆抗体是针对某一特定抗原中不同表位的不同抗体的混合物,因此也有可能包含针对无关蛋白的抗体,这可能会影响测定结果。 此外,多克隆抗体的产生依赖于其来源动物,即使针对的是同一种抗原,也没有2个生产批次的多克隆抗体是完全相同的。相反,单克隆抗体来源于杂交瘤细胞,这是一类永生的克隆细胞系,由小鼠或其他物种的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成。此类细胞可以源源不断地产生完全相同的特异性抗体,这即是现在生产抗体的标准技术。

抗体应用列表

应用 详情 缩写
免疫印迹法 凝胶类型: 还原的, 天然的 WB
裂解产物类型: 细胞裂解产物, 组织裂解产物, 免疫原过表达裂解产物
单细胞免疫印迹法(single cell Western) scWB
免疫组织化学 固定: 丙酮, 乙醇, 福尔马林/甲醛/多聚甲醛, 甲醇, 微波, 加热 IH
包埋: 丙烯酸/塑料, 见如下
包埋: 石蜡 IHC-P
包埋: 冰冻 IHC-F
自由漂浮切片法 IHC-Free
免疫细胞化学 IC
邻位连接技术 PLA
in-cell Western ICW
流式细胞术 FC
细胞分选 FACS
免疫沉淀 IP
染色质免疫沉淀 ChIP
染色质免疫沉淀序列测定 ChIP-Seq
RNA免疫沉淀 RIP
交联免疫沉淀 CLIP
免疫测定
ELISA ELISA
放射性免疫测定 RIA
酶联免疫测定 EIA
免疫-PCR I-PCR
功能测定
激活 A
封闭/中和 Neut
电泳迁移实验 EMSA
质谱 MS
抗肽抗体稳定同位素标准和捕获 SISCAPA
免疫-MRM I-MRM
免疫-MALDI iMALDI
封闭/中和 Neut
质谱免疫分析 MSIA

作者:生物耗材网 | 来源:bioconsumable.com  【打印此页】 【返回】【顶部】【关闭】