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EpiQuik 循环游离DNA分离试剂盒

生物耗材网:bioconsumable.com | 更新时间:2015-4-22

产品名称EpiQuik 循环游离DNA分离试剂盒,EpiQuik Circulating Cell-Free DNA Isolation Kit

货号:P-1064

规格:25次、50次

EpiQuik™循环游离DNA分离试剂盒基于大小分级技术采用磁珠从血浆/血清样本中的单核小体和二聚体核小体复合物中循环游离DNA(ccfDNA)。分离的ccfDNA可直接用于real time-PCR和DNA文库制备适合于下一代测序。这个试剂盒具有以下优点:

1.         基于大小分级技术使用创新的磁珠从血浆/血清中选择性地分离170 bps循环游离DNA,分离的DNA可直接用于qPCR和NGS的DNA文库构建。

2.         快速和简单的程序可以在2小时内完成,无需凝胶,分离柱或离心。

3.         有效去除蛋白质,盐,核酸酶,PCR抑制物质及其他杂质,如多糖,多酚类和脂。

4.         灵敏和有效的DNA捕获使成功地高回收率分离DNA(>80%总单核小体DNA ),即使当起始材料的量是有限的(低至0.1毫升)。

5.         手工和自动化的友好融合–可扩展为单管或96孔板操作。

背景信息:

血清/血浆或其他体液中的循环游离DNA的遗传和表观遗传分析,为广泛的临床疾病如癌症、自身免疫性疾病、感染或胎儿的疾病的早期检测,提供了一个极难得的机会。结果表明,具有临床意义的ccfDNA显著地表现为来源于核小体的约170 个碱基的片段和较小部分的来源于二聚体核小体的约360个碱基的片段。这种核小体复合体是细胞凋亡过程中释放到血液循环中,在各种疾病情况下,如炎症,肺栓塞,自身免疫性疾病和癌症,核小体复合体将增加。它也表明,使用这样的核小体复合体中的ccfDNA为遗传或表观遗传分析能提供更好更准确的生理和病理状态的鉴定。目前用于从血浆和血清分离ccfDNA的方法有许多种。所有这些方法都是基于硅胶柱结合DNA或酚氯仿抽提分离。通过这些方法分离的DNA包含ccfDNA和非ccfDNA,这可能会影响下游分析的准确性。为了解决这些问题, Epigente提供EpiQuik™循环游离DNA分离试剂盒用于ccfDNA的分离。

原理与程序:

EpiQuik™循环游离DNA分离试剂盒包括了所有优化的组分,能够从血清/血浆中快速分离小规模核小体DNA。采用一定大小的磁珠(ccfDNA捕获磁珠)来形成磁场(epimag™HT(96孔)磁分离器或类似)能有效地捕获单核小体和二聚体核小体复合物, 捕获的核小体DNA然后酶解释放,通过清洗磁珠使用MQ Binding Beads纯化。纯化的ccfDNA从磁珠上洗脱下来可立即使用或储存。

起始材料:

各种来源的包括新鲜的和冰冻的血浆/血清都可以使用。然而,新鲜的血浆/血清与冷冻相比一般会带来更高的DNA的产量。此外,冰冻血浆/血清将导致每年10%左右的DNA损失。血浆/血清的输入量可以从0.1ml-1ml,标准的样品体积是0.5毫升。如果使用血清样品,在抽出血液后血清样本要在6小时内制备好,在血清分离过程中,因为外周血淋巴细胞的裂解可能引起DNA量的人为增加。

工作流程图:

作者:生物耗材网 | 来源:bioconsumable.com  【打印此页】 【返回】【顶部】【关闭】